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重庆西南医院烧伤科

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表皮干细胞培养技术

 

表皮干细胞(epidermal stem cells, ESCs)是一种具有产生至少一种以上高度分化子代细胞潜能的细胞。表皮干细胞的存在是组织再生和创伤修复的基础,修复皮肤创伤烧伤和植皮手术都归功于表皮干细胞。由于表皮干细胞终身存在,其遗传信息可以传给子代,因而表皮干细胞不仅可以用来研究基因的作用以及某些疾病发病的基因机制,同时也可以用来对一些遗传性皮肤病进行基因治疗。

   

1) 首先将已脱离人或动物的皮肤,在超净工作台上用生理盐水冲洗,去血污及毛发;

2)将皮肤与皮下组织分开,皮肤切块,浸泡在一种蛋白水解酶中几小时;

3)将表皮和真皮分开,将表皮剪碎,0.5%胰酶消化成单个细胞,含10%FBS(无Ca2+)的1640培养基终止消化,离心;

4)弃培养基,加入无血清培养基放入培养瓶中置于CO2培养箱中培养,培养箱内的条件为5%CO2,饱和湿度,37℃;,每两天换液一次;

5)1天后,细胞贴壁呈铺路石样生长,3-4天后,细胞聚集呈克隆样生长;

6)对所获得细胞进行当前同行公认的表皮干细胞分子标志的检测。